酶標(biāo)儀與分光光度計的區(qū)別與優(yōu)缺點

更新時間：2020-10-15 | 點擊率：3461

　　酶標(biāo)儀和分光光度計都是實驗室常用的分析測量工具，它們的測定原理是相同的，都是使用朗伯-比耳定律，測定的都是樣本的吸光度。

　　一、酶標(biāo)儀和分光光度計的三大差別

　　酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀。是酶聯(lián)免疫吸附試驗的儀器又稱微孔板檢測器?？珊唵蔚胤譃榘胱詣雍腿詣?大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。測定一般要求測試液的終體積在250μL以下，用一般光電比色計無法完成測試，因此對酶標(biāo)儀中的光電比色計有特殊要求。

　　分光光度計，又稱光譜，是將成分復(fù)雜的光分解為光譜線的科學(xué)儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780nm的可見光區(qū)和波長范圍為200～380nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其*的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。

　　同為，實驗室內(nèi)測定吸光度的儀器，酶標(biāo)儀和分光光度計存在一些不同之處，具體差別體現(xiàn)在以下三個方面：

　　(1)盛裝待測溶液的容器：

　　分光光度計用的是比色皿，酶標(biāo)儀使用的是塑料微孔板(酶標(biāo)板)。比色皿只能起到盛裝溶液的作用，每個比色皿一次只能盛裝一種溶液。酶標(biāo)板常用透明的聚乙烯材料制成，對抗原抗體有較強的吸附作用，因此用它作為固相載體，酶標(biāo)板通常為48孔或96孔，每個微孔可以盛裝不同的溶液。

　　(2)光路的方向：

　　分光光度計是水平光路，而酶標(biāo)儀則是垂直光路。由于酶標(biāo)板盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過,因此酶標(biāo)儀的光束都是垂直通過待測溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過比色液。垂直光的特點是標(biāo)本吸光度受液體濃縮或稀釋的影響小，不足之處是受被測樣本液面是否水平、酶標(biāo)板透光性、孔底是否平整等的影響較大。

　　(3)光路的長度：

　　由于光密度(OD值)與吸光系數(shù),待測組分的濃度以及光路長度成正比關(guān)系。

　　分光光度計采用的比色杯的寬度通常是1cm，所以光路長度固定為1cm。因此不同儀器，不同批次測量的數(shù)據(jù)具有同樣的可比性。

　　而酶標(biāo)儀采用的是垂直光路,所以光路的長度應(yīng)該是液體液面的高度。所以測得的值受到樣品的體積的影響。

　　二、酶標(biāo)儀和分光光度計的優(yōu)缺點比較

　　分光光度計：

　　優(yōu)點：1、檢測波長范圍較寬；2、加樣量不一致對測量結(jié)果沒有影響。

　　缺點：1、工作量大，操作繁瑣，耗時；2、耗試劑；3、結(jié)果穩(wěn)定性差，重復(fù)性較差，誤差較大；4、對于微量物質(zhì)，難以檢測到。

　　主要應(yīng)用領(lǐng)域：藥品檢驗、藥物分析、環(huán)境檢測、衛(wèi)生防疫食品、化工、科研等領(lǐng)域?qū)ξ镔|(zhì)進行定性、定量分析。

　　酶標(biāo)儀：

　　優(yōu)點：1、一次性處理樣品量大，省時；2、樣本、試劑用量少；3、操作簡單，重復(fù)性好，檢測速度快、效率高。

　　缺點：1、酶標(biāo)儀96孔板在紫外光區(qū)有較強的紫外吸收，應(yīng)盡量避免在300nm以下使用酶標(biāo)儀進行含量測定；2、必須確保微孔板每個孔加樣量嚴(yán)格一致，對實驗者的操作技能提出了更高的要求。